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地址:株洲市天元高新区天易科技城E6栋货号:SZ011; 单位 ;份 ; 包装 :10份/盒 ; 用途:生活饮用水中总大肠菌群测定(GB/T 5750.12-2006-多管发酵法)
产品信息
产品名称 总大肠菌群测定试剂盒
货 号 SZ011
单 位 份
包 装 10份/盒
产品描述 每一盒试剂盒内装有10份15管组乳糖蛋白胨培养液。每一份15管组乳糖蛋白胨培养液由前排5管浓缩的双料乳糖蛋白胨培养液和后排10管浓缩的单料乳糖蛋白胨培养液组成。每份产品测试1个样品。
用 途 生活饮用水中总大肠菌群测定(GB/T 5750.12-2006-多管发酵法)
配套试剂 革兰氏染色液、伊红美蓝平板(货号:SZ021)、乳糖发酵管(货号:SZ019)。配套试剂需要根据实际情况另外采购。
使用方法
(一)实验准备
1.排气泡
如果试剂盒产气窗内有气泡,将试剂盒前后倾斜约45度,并轻敲台面,以排除气泡。
2.开孔
使用专用开孔器,经酒精消毒或经火焰消毒并冷却后在试剂盒每个管口的封膜上穿刺开孔。
(二)乳糖发酵试验
1.接种方案
接种量:15管共55.5毫升。自来水厂经常检验或每天检验一次的,只需接种5管共50mL即可。
1.1.前排5管接种
用10毫升移液器,在试剂盒前排5个大方管内接种水样各10毫升。自来水厂经常检验或每天检验一次的,样品只需接种前排5管,每管10mL即可。
1.2.后排左边5管接种
用1毫升移液器,在试剂盒后排左边5管内接种水样各1毫升;另吸取水样1毫升,加入含9毫升无菌水的管子内摇匀,制成1:10的稀释样品。
1.3.后排右边5管接种
用1毫升移液器,在试剂盒后排右边5管内接种1:10的稀释样品各1毫升,盖上盖子,置于36℃±1℃培养箱内,培养24小时后,观察结果。
2.初发酵试验结果判断
培养基变黄色,产气窗内有气泡者为阳性管;培养基变黄色,产气窗内无气泡者为可疑阳性管,否则为阴性管。
(三)分离培养
将阳性管和可疑阳性管内的菌液分别接种到伊红美蓝平板上,经36℃±1℃培养24小时后挑取符合特征的菌落进行革兰氏染色和镜检试验。
(四)证实实验
将染色镜检为革兰氏阴性无芽孢杆菌的菌落,接种到乳糖蛋白胨培养液中,经36℃±1℃ 培养24小时。
1.乳糖蛋白胨管排气泡
如果乳糖蛋白胨管内的倒管中有气泡,将乳糖蛋白胨管倒置,并前后或左右,以排除倒管内气泡。
2.乳糖蛋白胨管接种
将阳性管与可疑阳性管内的菌液分别用乳糖蛋白胨管盖子下自带的接种环蘸取一环,接种于乳糖蛋白胨管内,盖紧盖子并编号,于36℃±1℃培养箱内,培养24小时后,观察结果。
3.结果判断
乳糖蛋白胨管经培养后,培养基变黄色,倒管内有气泡者为阳性管,否则为阴性管。
(五)结果报告
根据证实试验的乳糖蛋白胨管阳性数,查接种15管或接种5管的MPN检索表,报告结果:单位为MPN/100mL。
以接种15管为例,前排5管共有2管阳性,后排左边5管共有1管阳性,后排右边5管共有1管阳性,则依据2-1-1,查接种15管的MPN表,得出结果为,9MPN/100mL。
如果是自来水厂自检,只接种5管,则据乳糖蛋白胨管阳性数查接种5管的MPN检索表报告结果。
如果所有乳糖蛋白胨管均为阴性,可报告大肠菌群未检出。
说明 ● 开孔器:每次发货时适量配置1个~2个于包装箱内并注明。
● 实验室完成该项指标的检测,另外需要如下配套试剂:伊红美蓝平板、革兰氏染色液、乳糖蛋白胨管。
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